Klasifikace embryí v IVF | SM-klinika

I přes snahu vědců a praktikujících reprodukčních specialistů se stále nepodařilo přiblížit k bodu, kdy téměř každý pokus o mimotělní oplodnění končí porodem. Nabízí se tedy rozumná otázka: co ovlivňuje kvalitu embryí při IVF, jak ji hodnotit, jaké další kroky a postupy podniknout.

Co je kvalita oocytů?

Bezprostředně po získání samičích a samčích zárodečných buněk je na základě morfologických charakteristik hodnocena jejich kvalita. To je důležité, aby se embryolog mohl správně rozhodnout o způsobu oplodnění. V závislosti na situaci se může jednat o klasické IVF nebo protokol doplněný o ICSI nebo PICSI. V druhém případě je spermie zavedena do cytoplazmy vajíčka pomocí tenké jehly.

Oocyt (ženská reprodukční buňka) může mít různé stupně připravenosti k oplodnění. Proto se rozlišují tyto typy vajíček: nezralá, zralá, degenerativní a zničená. Třída oocytu je určena stavem genetického materiálu v buněčném jádře. Zralá vajíčka, která lze oplodnit, mají první polární tělo (takové buňky jsou označeny M II).

Nezralá vajíčka nelze oplodnit. Obvykle je proces zrání ženské gamety přerušen v časnějším stadiu meiotického dělení v důsledku vnitřních nebo vnějších příčin a také v důsledku nesprávného podání spouštěče (například lidského choriového gonadotropinu v cyklu IVF).

Špatná kvalita vajec během IVF – důvody

Kvalita embryí při IVF je dána jednak kvalitou genetického materiálu vajíčka a jednak kvalitou spermatu. Následující faktory mohou být důvodem špatného stavu ženských reprodukčních buněk:

• nepříznivé podmínky prostředí – znečištění ovzduší výfukovými plyny vozidel a průmyslovými emisemi;
• toxické účinky způsobené kouřením, zneužíváním alkoholu, vdechováním výparů domácích chemikálií, benzínových výparů a jiných toxických látek;
• gynekologická onemocnění, zejména ta, která vedou k hormonální nerovnováze;
• snížená nebo nedostatečně reagující imunita;
• dlouhodobý nebo extrémní stres;
• syndrom chronické únavy;
• obezita;
• nevyvážená strava, která vede k nedostatku vitamínů a minerálů;
• zvýšené radioaktivní pozadí;
• časté lety, které desynchronizují procesy probíhající v ženském těle.

Kromě výše diskutovaných vnějších příčin ovlivňuje výsledek těhotenství také kvalita embrya, a to nejen zárodečných buněk, z nichž se skládá. Jde o tzv. embryonální faktory, jejichž role je vysoká nejen při umělém oplodnění, ale i přirozeném početí. Téměř 50 % spontánních početí tedy končí potratem a žena tento stav ani netuší kvůli absenci zpoždění menstruace. Ve většině případů jsou příčinou takových velmi časných těhotenských ztrát chromozomální patologie embrya. Zpravidla jsou neslučitelné se životem, proto přirozeně umírají.

V rámci IVF pomáhá preimplantační diagnostika identifikovat takové stavy, kdy je vyšetřena chromozomální sada embrya před zavedením do dutiny děložní. Neprovádí se u všech párů, ale pouze pokud existují náznaky.

Také během vývoje se embryo může zastavit v jakékoli fázi oplodnění. Jedním z důvodů může být vyříznutí vnitřních zásob ženské gamety a vzniklé embryo ještě nemůže produkovat živiny, takže odumírá.

Klasifikace embryí podle kvality IVF

Klasifikace embryí podle kvality během IVF je založena na posouzení řady faktorů:

• vzhled: přítomnost nebo nepřítomnost zona pellucida, její tvar a vady zony;
• určitý počet buněk (blastomer), který závisí na dni života embrya a rychlosti jeho dělení;
• závažnost fragmentace: počet buněk nebo jejich fragmentů, které nemají DNA; míra fragmentace až 25 % se považuje za normální;
• velikost buněk, které musí být stejné a udržovat správný tvar;
• stav cytoplazmy – neměly by zde být žádné patologické inkluze jakéhokoli druhu.

Tradičně je akceptováno rozlišovat několik typů embryí během IVF s přihlédnutím k době jejich vývoje. To však není jediné kritérium, které je důležité při použití metod asistované reprodukce. Embryologové identifikují samostatná kritéria kvality embryí pro každou fázi jejich vývoje.

Vznik zygoty – první den vývoje

Přibližně 16-20 hodin po spojení vajíčka a spermie začíná embryonální vývoj, jak je indikováno objevením se pronukleí (kódovaných v protokolu IVF jako pN). Tyto struktury odpovídají genetickému materiálu přijatému od rodičů, běžně jsou dva, jeden od matky a jeden od otce.

Kvalita embryí při IVF v prvních dnech vývoje se posuzuje podle počtu a kvality pronukleí.

• Absence pronukleí ukazuje na nepřítomnost nebo zpoždění vývoje.
• Objevení se jednoho pronukleu může signalizovat dřívější nebo pozdější zahájení procesů buněčného dělení.
• Dvě pronuklea naznačují normální proces tvorby embrya.
• Detekce dvou nebo více pronukleů je známkou abnormálního oplodnění. Takové zygoty se nepoužívají v metodách asistované reprodukce a podléhají likvidaci.

Fragmentace – od prvního do čtvrtého dne vývoje

Během tohoto období se buňky embrya aktivně dělí. K posouzení kvality materiálu se používají dva parametry.

• množství buněk zvaných blastomery
• množství fragmentace.

Při klasifikaci embryí během IVF se používá písmenné a číselné označení. Číslo tedy označuje množství buněk (blastomer) a písmeno latinské abecedy označuje jejich kvalitu. Za dobrá embrya třetího dne vývoje se považují ta, která mají více než 5 blastomer, jejichž kvalita odpovídá kategoriím A a B.

Při hodnocení třídenních vajíček je jedním z hlavních kritérií stupeň fragmentace embryonálního materiálu. Tato klasifikace zahrnuje identifikaci 4 podtypů:

• Typ A jsou nejkvalitnější embrya. Jejich buňky se rychle dělí a mají kulatý tvar.
• Typ B – kvalita těchto embryí je o něco horší. To je indikováno nerovnoměrným tvarem buněk blastocysty a mírnou fragmentací.
• Typ C – počet fragmentovaných buněk se pohybuje od 20 do 50 %.
• Typ D – míra fragmentace je více než 50 %.

Počínaje 3. dnem mohou být embrya zmrazena pro použití v následných IVF procedurách. Kryokonzervace umožňuje implantaci v přirozeném cyklu bez stimulace vaječníků hormonálními léky, což zvyšuje šance na úspěšné otěhotnění a následný porod.

Zhutnění do stádia moruly – od třetího do pátého dne vývoje

Od konce třetího dne se hranice mezi buňkami embrya postupně smazávají. Tento proces se nazývá zhutňování a označuje začátek tvorby moruly.

Hodnocení stavu embrya v této fázi vývoje se nepoužívá, protože jsou neinformativní. Jediné, co lze posoudit, je, zda dochází ke zhutnění nebo ne.

Tvorba a růst blastocysty – od čtvrtého do sedmého dne vývoje

Od 4. dne se začíná tvořit blastocysta. Pro klasifikaci embryí se používají tři kritéria.

• Růstové stadium blastocysty (označené číslem od 1 do 6).
• Stav vnitřní buněčné hmoty je označen latinskými písmeny od „A“ do „C“. V tomto případě „A“ označuje velký počet buněk a vysoce kvalitní zhutnění, zatímco „C“ označuje nepřítomnost nebo malý počet buněk.
• Stav okolních buněk je také kódován od „A“ do „C“, kde „A“ je nejvyšší skóre.

Po vyhodnocení reprodukční specialista zařadí embryo do jedné ze šesti skupin.

1. Časná blastocysta: dutina tvoří méně než 50 % objemu embrya.
2. Průměrná blastocysta: zabírá více než 50 % embrya.
3. Velká blastocysta: vyplňuje celé embryo.
4. Fáze před vylíhnutím: objem embrya se zvětšuje a jeho membrána se natahuje a ztenčuje.
5. Fáze líhnutí: skořápka je v procesu ničení.
6. Výstup ze skořápky: embryo je připraveno k implantaci do děložní sliznice.

Kvalita embrya je tedy označena třemi symboly, například 3AA. To znamená, že je ve stádiu velké blastocysty a vnitřní buněčná hmota a vnější buňky jsou dokonalé. Pro implantaci nebo kryoprezervaci se odebírá biologický materiál kvality ne nižší než B Přítomnost písmene C v označení je indikací k likvidaci.

Jak zlepšit kvalitu embryí během IVF?

Aby se zlepšila kvalita budoucích embryí ještě před vstupem do IVF programu, pár prochází rozsáhlou diagnostikou. Když jsou zjištěny různé odchylky od normy, jsou opraveny. Dále je předepsána předkoncepční příprava, která zahrnuje kyselinu listovou, omega-3 kyseliny, jód a další minerály a vitamíny.

Reprodukční centrum “SM-Clinic” poskytuje celou škálu služeb v rámci metod asistované reprodukce, přípravy na nadcházející těhotenství a jeho vedení. Klinika zavedla moderní protokoly, které nám umožňují dosáhnout vysoké míry účinnosti IVF. Domluvte si schůzku a staňte se rodiči zdravých miminek!

Otázky a odpovědi

Co dělají s embryi nízké kvality?

Reprodukční specialisté materiál likvidují, protože pravděpodobnost úspěchu IVF s jejich implantací je nulová.

Co dělat pro zlepšení kvality embryí?

Před vstupem do protokolu IVF musí pár projít úplným vyšetřením a dodržovat zásady zdravého životního stylu po dobu nejméně 3 měsíců. Jedná se o správnou výživu, pravidelnou lehkou fyzickou aktivitu, dostatečný spánek, minimum stresu a procházky na čerstvém vzduchu. V případě potřeby můžete na doporučení lékaře užívat vitamíny a mikroelementy.

zdroje

• E.N. Mayasina, D.F. Salimov, T.V. Lisovskaya Nízká kvalita oocytů jako příčina fragmentace embrya v programu oplodnění in vitro: klinický případ // Geny a buňky. 2020. Č. 2.
• Zazulina Yana Aleksandrovna, Samykina Olga Viktorovna, Melnikov Vladimir Aleksandrovich Multivariační analýza prediktorů účinnosti metody in vitro fertilizace ve fázi implantace embrya // Bulletin vědeckého centra Samara Ruské akademie věd. 2015. č. 2-2.
• Iskhakov I.R., Iskhakova R.S. Raná lidská embryonální kultura a oxidace volnými radikály // Bioradikály a antioxidanty. 2015. č. 1.
• Kovalenko Ya.A., Malko Anna Vladimirovna, Ryazantsev I.I., Trunyan D.G., Filippov E.F., Krutova V.A. Vliv věku pacientek na kvalitu získaných oocytů, embryí a výsledky programů asistované reprodukce // Kuban Scientific Medical Bulletin. 2018. č. 1.
• Nefedova A. V., Pestova T. I., Rusakova M. D., Bryukhin G. V. Vliv stimulace ovulace a podmínek kultivace embryí na výsledek in vitro fertilizace u žen různých věkových skupin // Chelovek. Sport. Lék. 2011. č. 26 (243).