Clostridióza/Enterotoxin ( Clostridium difficile / Clostridium perfringens / Enterotoxin Cl. perfringens) PCR
Test rozlišuje mezi DNA Clostridium difficile, DNA Clostridium perfringens a DNA genu CPE Clostridium perfringens, který kóduje enterotoxin, pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase (PCR).
Klostridióza je toxická infekce, jejímž faktorem patogenity jsou vylučované toxiny. Charakteristickým znakem klostridiových patogenů je jejich polypatogenita. Postihují jak lidi, tak zemědělská, domácí i divoká zvířata.
Zvláště nebezpečné jsou botulismus (C. botulinum), tetanus (C. teteni), plynatost (C. perfringens), anaerobní enterotoxémie (C. perfringens, C. difficile).
1. Klostridie jsou rozšířené. Nacházejí se jako součást normální střevní mikroflóry zvířat a neprodukují toxiny, které mohou vést k toxické infekci.
2. Přenašeči klostridiózy jsou savci, ptáci, plazi, členovci a exotická zvířata.
3. Patogenní klostridie se dělí na neurotoxické, histotoxikogenní a enterotoxemické.
Enterotoxemické druhy Clostridia produkují různé typy toxinů a způsobují průjmová onemocnění u lidí a zvířat, ale malá domácí a exotická zvířata nemají specifickou ochranu proti Clostridium perfringens a Clostridium difficile. Enterotoxin C perfringens (CPE) je hlavní toxin, Cl. perfringens typu A, způsobuje gastrointestinální onemocnění a je spojován s nenutričními průjmovými onemocněními u různých zvířat.
4. Potřeba stanovení patogenních klostridií u domácích zvířat je spojena s jejich vysokou epizootologickou nebezpečností pro zvířata samotná i pro majitele člověka.
Přenosové cesty.
Střevní klostridióza se vyskytuje jak ve formě sporadických onemocnění, tak ve formě epidemií.
Zdrojem nákazy jsou lidé a zvířata. K infekci dochází prostřednictvím nutričních cest
Požadavky na biomateriál
Zvířata: Savci (hospodářská zvířata, psi, kočky, hlodavci, lidé), ptáci (volně žijící, domácí, zoo ptactvo), exotická zvířata, plazi, členovci Materiál: Výkaly – ptáci, plazi, hlodavci Výtěr z rektální sliznice – všechna ostatní zvířata . Pitevní a bioptický materiál (patologické orgány (svaly, střeva, slezina) při úmrtí nebo diagnostické pitvě) Skladování: Výkaly, pitevní a bioptický materiál – chlazené (+2 – +8) – 1 den. Stěr z rektální sliznice – chlazený (+2 – +8) – 2 dny Delší skladování, kromě výkalů, je možné zamrazit na -20. Doprava zamrzlá.
Diagnostické informace
Clostridium difficile je grampozitivní, anaerobní, spóry, pohyblivá tyčinková bakterie, která se běžně vyskytuje ve střevním traktu mnoha druhů savců, plazů a ptáků. Nachází se také v životním prostředí. Má více než 400 unikátních typů a několik faktorů virulence. Nejvýznamnějšími faktory jsou exotoxiny A a B a bakteriální produkce exotoxinů koreluje s patogenitou jednotlivých kmenů C. difficile. Toxin A je enterotoxin, který podporuje sekreci tekutiny ze střevní sliznice a působí synergicky s cytotoxickým toxinem B prostřednictvím navázání na specifické receptory na povrchu enterocytů. Kombinovaný účinek těchto toxinů vede k nekróze povrchového epitelu a edému v postižených oblastech střeva. Clostridium perfringens je grampozitivní, tyčinkovitá, anaerobní, sporotvorná bakterie, která je normální složkou rozkládající se vegetace, mořských sedimentů, střevního traktu lidí a jiných obratlovců, hmyzu a půdy. Infekce způsobené C. perfringens mohou vést k nekróze tkáně, bakteriémii, emfyzematózní cholecystitidě a plynové sněti. Bakterie mohou vylučovat α-toxin, což vede ke vzniku gangrény. Pokud dojde k požití bakterií, může to vést ke kolikě a průjmu.